為規范兒童呼吸道感染病原體核酸檢測的臨床應用,相關領域專家發表了《兒童呼吸道感染病原體核酸檢測專家共識(2022)》,以指導兒童呼吸道感染病原體的核酸檢測。為進一步解決呼吸道感染病原診斷核酸檢測技術在成人呼吸道感染中的規范應用,中華檢驗醫學培訓工程專家委員會組織我國多學科專家共同撰寫了《成人呼吸道感染病原診斷核酸檢測技術臨床應用專家共識(2023)》。
在核心專家意見部分,明確了PCR核酸檢測方法不同技術方案推薦應用于不同的場景。并指實時熒光PCR包括單靶標或多靶標呼吸道病原體核酸檢測,可作為核酸即時檢測法的參考方法,主要適用于門急診、住院患者和大規模人群篩查。針對免疫功能正常、存在住院風險的氣管支氣管炎成人患者,建議采用多靶標病原體核酸檢測技術明確病原,以縮短抗生素使用時間和患者住院時間。對重癥社區獲得性肺炎患者同時進行常規病原學檢查和核酸檢測,以提高病原體檢出率。
推薦意見1:
實時熒光PCR包括單靶標或多靶標呼吸道病原體核酸檢測,可作為核酸即時檢測法的參考方法,主要適用于門急診、住院患者和大規模人群篩查。
推薦意見2:
免疫功能正常、存在住院風險的氣管支氣管炎成人患者。針對此類人群,建議采用多靶標病原體核酸檢測技術明確病原,以縮短抗生素使用時間和患者住院時間。
推薦意見3:
建議對重癥社區獲得性肺炎患者同時進行常規病原學檢查和核酸檢測,以提高病原體檢出率。
推薦意見4:
醫院獲得性肺炎和呼吸機相關肺炎患者,病原學診斷應以傳統培養方法為主,必要時聯合采用多靶標病原體核酸檢測,無需常規行mNGS,僅在患者存在免疫缺陷、3d內未通過傳統微生物檢驗明確病原體且經驗性抗感染治療無效時,考慮行以DNA測序為主的mNGS。
二、呼吸道病原體核酸檢測方法
實時熒光PCR檢測技術
實時熒光PCR技術是一種可對核酸進行定量的試驗方法,其原理主要是通過實時采集熒光信號對核酸擴增進行監測。其特點是靈敏度和特異度好,但特異性引物探針的成本和對儀器的要求較高。主要適用于門急診、住院患者和大人群篩查,基于分子檢驗平臺進行病原體(包括病毒、細菌、真菌、非典型病原體)的核酸檢測,檢測標本類型以鼻咽拭子、痰和支氣管肺泡灌洗液(BALF)為主。
需根據疾病流行情況、患者病情嚴重程度、癥狀持續時間、合并癥情況、免疫抑制狀態評估結果、其他輔助檢查結果的可參考性以及對預后的初步評判,決定是否對疑似急性上呼吸道感染的上述患者進行檢測。
新型冠狀病毒肺炎或流感大流行期間,快速分子檢測有助于預檢分診、縮短就診時間、減少傳染病傳播風險;又如,當患者免疫功能嚴重受損,同時疑似流感樣癥狀時,或者呼吸道病毒檢測可能會影響醫生抗病毒藥物或停用抗生素的決定時,需要對呼吸道病毒進行檢測。
在流行風險高的季節,高危人群(老年人、兒童、孕產婦、合并基礎疾病患者)進行流感病毒檢測可能比經驗性抗流感治療更經濟。此外,快速的結果反饋(如2h內即出結果的快速分子檢測)能夠縮短患者門急診就診時間,降低流感傳播風險,有利于傳染病控制。
在流感病毒、新型冠狀病毒等大流行期間,門急診針對上述兩種病毒的抗原檢測或分子診斷技術有助于快速分診并指導隔離防控,避免院內傳播,但前者敏感性低于后者。對于免疫功能正常且存在住院風險的成人患者而言,盡快采用多重PCR技術明確病原,可能會縮短抗生素使用時間和住院時間,但兒童毛細支氣管炎患者并不推薦常規病毒檢測。
若懷疑為支原體、衣原體、軍團菌、病毒等感染時,可采用血清特異性抗原、抗體檢測聯合核酸檢測和分離培養;實時熒光PCR、等溫擴增、數字PCR、高通量測序技術可同時檢測多種病原體,提供病原體分型、毒力基因和耐藥基因等深入分析。如果臨床傾向于RNA病毒感染,建議選擇RNA高通量測序。危重癥患者同時開展常規病原學檢查輔以病原體核酸檢測,兩者可相互補充,有利于快速準確確定致病原,更好地服務于臨床。
對于有流行病學史、流感樣癥狀或病情嚴重需要住院治療的AECOPD患者,推薦盡早進行流感病毒、新型冠狀病毒等呼吸道病毒的抗原和/或核酸檢測,核酸檢測的敏感性高于抗原檢測。
免疫功能受損患者,發生下呼吸道感染時病原學構成更加復雜,條件致病菌、少見病原體、混合感染發生的比例更高,此時患者病情更重、進展更迅速。可考慮多種方法并行送檢,臨床常需積極開展涵蓋目標病原體的多靶標核酸檢測或 mNGS以盡早診斷致病病原體。
「肺」你不可,靈動「甲乙」
呼吸道感染解決方案
參考文獻:
徐英春,瞿介明,中華檢驗醫學培訓工程專家委員會等.成人呼吸道感染病原診斷核酸檢測技術臨床應用專家共識(2023)[J/OL].協和醫學雜志:1-23.
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